yy易游体育网页版下载:动物行为试验办法丨啮齿动物睡觉水掠夺试验

来源:yy易游体育网页版下载    发布时间:2025-10-29 05:27:33

详细介绍

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  该办法是研讨睡觉功用及其对认知、心情和神经健康影响的经典试验技能,主要是经过改良多渠道法(Modified Multiple Platform Method, MMPM)完成,运用动物对落水的天性惊骇来中止睡觉。MMPM是一种牢靠、低应激的睡觉掠夺建模办法,经过周期性落水机制搅扰动物睡觉,大范围的运用在睡觉妨碍、心情与认知功用研讨。

  当啮齿动物(小鼠或大鼠)进入慢波睡觉(SWS)或快速眼动睡觉(REM)时,肌肉张力下降,站立不稳,会从渠道滑入水中而被逼觉悟。经过重复打断睡觉进程,完成继续的睡觉掠夺,特别可有用按捺REM睡觉(又称“对立睡觉”)。

  雄性C57BL/6J小鼠(8周龄以上)养殖于12小时光照周期(上午7点开灯),自在吸取规范鼠粮和自来水。

  选用改良多渠道法对小鼠进行24小时睡觉掠夺,从上午9点开端。该办法已被证明可有用消除对立睡觉(PSD,即REM睡觉)并削减慢波睡觉(SWS)。

  笼内设置多个直径和高度均为2.54 cm的圆形PVC渠道,渠道距离足够大,防止小鼠在渠道上躺卧或接连睡觉;

  环境对照组:小鼠置于相同MMP设备中24小时,但不加水,以扫除设备自身和搬运操作的影响;

  在底部固定15个圆形渠道(高5-8cm,直径6.5 cm),呈3行5列摆放,行距离约13 cm,列距离约10 cm;

  用记号笔符号尾根编号,称重后除掉过轻或过重个别,随机分为模型组和对照组;

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  1. 建模时刻:每日18:00至次日8:00,继续14小时,接连21天。

  运用定制塑料水箱(110×60×40 cm³),底部固定15个圆形渠道(直径6.5 cm,高8 cm),呈3行5列摆放,距离合理,保证大鼠可站立但无法躺卧歇息。

  向箱内注入约7 cm深的温水(25±3 °C),水面距渠道顶端约1 cm。

  将模型组大鼠轻柔投入水中(非直接放于渠道),激起其对水的惊骇,促使其自动爬上渠道;大鼠在REM睡觉期因肌肉松懈会滑落水中而当即吵醒,以此来完成选择性睡觉中止;

  试验期间全程监控,防止大鼠长时刻溺水;若某只大鼠落水超越1小时未爬回,当即取出并除掉;每日8:00完毕试验,取出模型组大鼠,用吹风机吹干毛发,查看编号并补标,送回原笼歇息,自在饮食。

  比较单渠道法,多渠道规划答应多只大鼠同箱同处,坚持社交互动,显着下降应激;有用诱导REM睡觉掠夺,适用于研讨睡觉掠夺对神经行为及认知功用的影响。

  改良多渠道法是一种牢靠、低应激的睡觉掠夺建模办法,经过周期性落水机制搅扰大鼠睡觉,大范围的运用在睡觉妨碍、心情与认知功用研讨。

  一切测验在行为学试验室做,防止噪音和强光搅扰。优先进行旷场试验(OFT),因其对后续行为影响最小。

  1. 查看摄像机是否掩盖开阔场箱全区域并与工作站衔接,调理光照消除暗影;

  5. 输入编号开端录像,记载5分钟内直立(rearing)和攀爬等笔直活动次数;

  2. 抓起大鼠背部皮肤,轻放于开臂与闭臂交界处,使其面向左边开臂,敏捷撤离;

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