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蛋白表达常用培养基及缓冲液装备
发表时间: 2025-08-10 11:26:52 作者: 染色液
Tryptone 7.2g,yeast 14.4g,甘油3g,磷酸氢二钾9.86g,磷酸二氢钾1.4g,去离子水拌和溶解,定容至600ml(可分装成两瓶运用),其他量顺次扩大;
Tryptone 1g,yeast 6g,氯化钠1g,去离子水溶解拌和,定容至100ml;其他量顺次扩大;
精确称取L-谷氨酸,L-亮氨酸,L-异亮氨酸,L-赖氨酸,L-甲硫氨酸各500g溶于100ml去离子水中,过滤灭菌,4℃保存;
上述培养基YNB,甲醇,生物素,氨基酸过滤除菌,葡萄糖108℃灭菌30min,其他120℃高压灭菌20min;
A液:丙烯酰胺29.2g,甲叉双丙烯酰胺0.8g,去离子水拌和溶解,定容至100ml;
AP:10%过硫酸铵:5g(0.5g)过硫酸铵,溶于50mL(5mL)去离子水中;现配现用或分装至0.5mL离心管中冷冻备用。
依据要别离的样品(DNA)巨细制造适宜浓度的琼脂糖凝胶。精确称取一定量的琼脂糖干粉,参加到适宜体积的锥形瓶中,参加一定量的电泳缓冲液(30ml左右TAE);放入到微波炉内加热消融,冷却顷刻(不棘手即可);消融后的琼脂溶液摇晃混匀,倒入电泳槽中,等其凝结;室温下凝结30-40min左右,当心的拔出梳子,取出凝结好的凝胶4℃保存;
制造1L,在1L烧杯中精确称取Tris3.0g,甘氨酸14.4g,SDS1.0g,,去离子水拌和溶解,定容至1L;
制造1L,在1L烧杯中精确称取Tris5.8g,甘氨酸2.9g,SDS0.37g,甲醇200ml,参加去离子水拌和溶解,定容至1L;
R250(1L):在适宜体积的烧杯中,精确称取R2501.0g,甲醇450ml,乙酸100ml,充沛的溶解。
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